期刊简介
1978年8月创刊，中华医学会主办。本刊为我国惟一的显微外科专业性刊物，是中华医学会显微外科学会的学术性期刊；一直是中文核心期刊,被国内所有检索系统和数据库及WPRIM收录，被引频次、引文和影响因子等一直名列全国科技期刊前列。本刊及时报道国内外显微外科的新进展，反映我国显微外科水平和发展方向，同时积极介绍基层医院开展和普及显微外科的情况，适合从事显微外科、骨科、整形外科、手外科、神经外科、关节外科、泌尿外科、口腔颌面外科、眼科、耳鼻喉科、妇科、脊柱外科、腔镜和内镜的应用等手术学科及解剖学等基础医学专业人员投稿和阅读。
往期目录
-
2000
-
2001
-
2002
-
2003
-
2004
-
2005
-
2006
-
2007
-
2008
-
2009
-
2010
-
2011
-
2012
-
2013
-
2014
-
2015
-
2016
-
2017
-
2018
首页>中华显微外科杂志
- 杂志名称：中华显微外科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1001-2036
- 国内刊号：44-1206/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：广东省优秀期刊奖期刊收录：CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 维普收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), 上海图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 国家图书馆馆藏
携带增强型绿色荧光蛋白的慢病毒载体转染大鼠脂肪干细胞
李绍磊；杨有优；刘云江；江丽；牛晓峰；许银峰；易建华
关键词：脂肪干细胞, 转染, 绿色荧光蛋白, 慢病毒载体, 周围神经
摘要：目的 探索脂肪于细胞(ADSCs)的标记方法,观察增强型绿色荧光蛋白(EGFP)阳性ADSCs(EGFP-ADSCs)的体外活性、干细胞特性及体内短期活性. 方法 用携带增强型绿色荧光蛋白(eGFP)基因的慢病毒载体(Lv-eGFP)在感染复数(MOI)为0、1、5、25、50、100时,转染SD大鼠ADSCs 12 h,荧光显微镜及流式细胞仪检测转染效率和荧光强度;MTT法评价转染后细胞活性;EGFP-ADSCs分别行成脂分化及油红O检测、成骨分化及茜素红染色;将EGFP-ADSCs注射到去细胞神经构建组织工程化神经,修复大鼠坐骨神经缺损,术后1周取材进行冰冻切片观察细胞在体内存活情况. 结果 转染4d后,EGFP阳性率及荧光强度达到高峰;EGFP基因表达不随细胞传代而消失.MOI=0、1、5、25、50、100时,EGFP阳性转染率分别为0.13％、31.09％、75.33％、92.66％、96.70％、98.38％.实验组阳性率与对照组(MOI =0)选择相比,差异均有统计学意义(P ＜0.05);MOI =25、50、100时,组间阳性率差异无统计学意义(P＞0.05),但与MOI=1、5比时差异(P＜0.05).MTT试验观察10 d内MOI=25、50、100组细胞增值活性与非转染细胞差异无统计学意义(P＞0.05).选择MOI =25作为佳转染滴度进行后续实验.转染后ADSCs成骨、成脂分化20 d,茜素红染色见橘红色钙沉积,油红O染色见橙红色脂滴.1周冰冻切片观察细胞于体内呈梭形,均匀分布. 结论 慢病毒载体转染EGFP基因不影响ADSCs活性及成骨成脂分化能力,能为组织工程化神经修复缺损提供示踪种子细胞的方法.
友情链接